山东农业科学

2020, v.52;No.341(01) 1-9

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小麦Pinb基因启动子区CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建
Construction of Promoter Region CRISPR/Cas9 Genome Editing Vector of Pinb Gene in Wheat

张淑娟;张荣志;宋国琦;李玉莲;高洁;李玮;高世庆;李根英;

摘要(Abstract):

CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术已经逐渐成熟并在多种植物中得到成功应用,促进了基因功能的研究。小麦籽粒硬度是决定小麦加工品质的重要性状,Pinb是控制籽粒硬度的关键基因之一。本研究以小麦Pinb基因为对象,联合采用常规PCR和Golden Gate cloning技术,构建了包含小麦Pinb基因启动子区双靶点的CRISPR/Cas9基因编辑载体。将重组载体转入小麦原生质体中进行sgRNA活性的检测,在两个靶点位置均发生了突变,编辑效率分别为4. 57%和4. 37%,基因编辑类型包括碱基替换和碱基缺失。该研究为在小麦中实现Pinb基因的定点突变奠定了基础,对其功能研究和小麦品质改良均具有重要意义。

关键词(KeyWords): 小麦;CRISPR/Cas9;基因编辑;Pinb基因

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家转基因生物新品种培育重大专项(2018ZX08009-10B);; 山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2019G02);; 山东省农业良种工程项目(2019LZGC015);; 国家重点研发计划项目“主要农作物品质性状形成的分子基础”(2016YFD0100500)

作者(Author): 张淑娟;张荣志;宋国琦;李玉莲;高洁;李玮;高世庆;李根英;

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