贾玉;郑翠梅;张广民;陈秀亭;温亮;田福海;杨永花;

• 1:山东农业大学植物保护学院
• 2:蒙阴县烟草公司
• 3:沂水县烟草公司

摘要(Abstract)：

从山东临沂等地采集烟草炭疽病害标本,并进行分离、检测、鉴定。结果表明,山东烟草炭疽病原为毁灭炭疽菌。根据烟草炭疽菌与其它烟草病害病原菌核糖体转录间隔区(internal transcribed spacerI,TS)序列间的差异,设计了一对特异性引物Co1/Co2。利用此引物可从烟草炭疽菌总DNA中扩增约300 bp的特异性片段,其余菌株和对照PCR结果为阴性。灵敏度实验证明,可以检测到目的片段的DNA浓度为0.1 pg/μl。对土样检测结果表明,该引物能特异性地检测到Colletotrichum destructivum的存在,为快速、灵敏地检测烟草炭疽菌提供了应用依据。

关键词(KeyWords)： 烟草炭疽病菌;ITS;PCR;分子检测

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山东省烟草专卖局科技项目(鲁烟科[2008]20号)

作者(Author): 贾玉;郑翠梅;张广民;陈秀亭;温亮;田福海;杨永花;

Email:

DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2012.04.013

参考文献(References)：

• [1]朱贤朝,王彦亭,王智发,等.中国烟草病害[M].北京:中国农业出版社,2002,5-6.
• [2]Gunnel P S,Gubler W D.Taxonomy and morphology ofColletotrichum species pathogenic to strawberry[J].Mycology,1992,84(2):157-165.
• [3]Jorgensen R A,Cluster P D.Modes and tempos in the evolu-tion of nuclear ribosomal DNA:new characters for evolutionarystudies and new markers for genetic and population studies[J].Ann.Mo.Bot.Gard.,1988,75(4):1238-1247.
• [4]White T J,Bruns T,Lee S,et al.Amplification and DirectSequencing of Fungal Ribosomal RNA Genes for Phylogenetics[M].San Diego:Academic Press,1990:315-322.
• [5]Cano J,Guarro J,Gen J.Molecular and morphological iden-tification of Colletotrichum species of clinical interest[J].Journal of Clinical Microbiology,2004,42(6):2450-2454.
• [6]董微,陈万权,刘太国.小麦矮腥黑粉菌的鉴定及检测方法[J].植物保护,2007,33(6):128-131.
• [7]尹燕妮,黄艳霞,葛芸英,等.几种常用植物病原细菌分子检测方法[J].植物保护,2006,32(6):1-4.
• [8]Hsiang T,Goodwin P H.Ribosomal DNA sequence compari-sons of Colletotrichum graminicola from turfgrasses and otherhosts[J].European Journal of Plant Pathology,2001,107(6):593-599.
• [9]Apratim J L,Chakrabarti K,Mathur V P,et al.Genetic diversityof Colletotrichum graminicola isolates from India revealed byrestriction analysis of PCR-amplified intergenic spacer region ofnuclear rDNA[J].Current Science,2003,84(7):881-883.
• [10]吴志红,汪天虹,黄卫,等.简便易行的丝状真菌染色体DNA提取法[J].菌物系统,2001,20(4):575-577.
• [11]Volossiouk T,Robb E J,Nazar R N.Direct DNA extraction forPCR-mediated assays of soil organisms[J].Applied andEnvironmental Microbiology,1995,61(11):3972-3976.
• [12]谢成颂,张广民,王智发,等.烟草炭疽病菌的形态、生理及其对药剂反应的初步测试[J].中国烟草科学,1982,3:15-19.
• [13]Sutton B C.The genus Glomerella and its anamorph Colletotrichum[A].In:Bailey J A,Jeger M J.Colletotrichum:biology,pathologyand control Wallingford CAB:International[C],1992:1-26.
• [14]魏景超.真菌鉴定手册[M].上海:上海科学技术出版社,1979.
• [15]吴文平,张志铭,李玉琴.炭疽菌属(Colletotrichum Cda)分类学研究Ⅴ产直形孢子的种[[J].河北农业大学学报,1995,18(3):63-67.
• [16]张陶,张荣,李中义,等.中国炭疽菌属的分类研究Ⅲ[J].云南大学学报(自然科学版),2008,30(SI):9-10.
• [17]杨腊英,黄华平,黄俊生,等.香蕉炭疽菌rDNA ITS区的分子鉴定与检测[J].植物病理学报,2006,36(3):219-225.
• [18]唐俊辉,王伟,王源超.西瓜炭疽病菌Colletotrichumorbiculare的分子检测[J].中国农业科学,2006,39(10):2028-2035
• [19]谢勇,王云月,陈建斌,等.烟草黑胫病分子检测[J].云南农业大学学报,2000,15(2):176.
• [20]赵永强,张成玲,张广民,等.烟草根黑腐病菌的PCR分子检测[J].植物病理学报,2009,39(1):23-29.
• [21]Trout C L,Ristaino J B,Madritch M,Wangsomboondee T.Rapid detection of phytophthora infestans in late blight-infected potato and tomato using PCR.Plant Disease,1997,81:1042-1048.
• [22]王立安,王源超.大豆疫霉ITS分子检测[J].南京农业大学学报,2004,27(3):38-41.