山东农业科学

2018, v.50;No.328(12) 86-90

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利用人工ta-siRNA策略培育抗PVY烟草
Constructing Transgenic Tobacco with Resistance against Potato Virus Y Using Synthetic Trans-siRNA

吴斌;姜珊珊;张眉;徐德坤;辛志梅;王升吉;

摘要(Abstract):

人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势。本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟草TAS3a作为ta-siRNA表达的骨架,分别构建植物表达载体PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3',并利用叶盘法转化烟草NC89。瞬时表达检测结果显示,3个syn-tasiRNA植物表达载体均能在植物体内成功表达siRNA;抗病性鉴定发现,转PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3'的转基因株系中抗病株系的比率分别为45. 08%、27. 21%、61. 90%;Northern杂交分析显示,目的片段转录产物(总RNA)的积累量与植株的抗病性呈负相关,转基因植株中均有siRNA存在,表明植株的病毒抗性是由RNA介导的。

关键词(KeyWords): 人工ta-siRNA;马铃薯Y病毒(PVY);RNA介导的病毒抗性;转基因烟草

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山东省农业科学院青年科研基金项目(2015YQN26);山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2016A09-监测预警)

作者(Author): 吴斌;姜珊珊;张眉;徐德坤;辛志梅;王升吉;

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DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2018.12.017

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